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单克隆抗体脾细胞选择

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单克隆抗体脾细胞选择
 　　材料
　　(1)**过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。
　　(2)1640培养液  单克隆抗体制备流程
      (3)2.5%FCS－1640营养液
　　操作方法
　　(1)拉颈或用CO2处死小白鼠。
　　(2)将小鼠放于70%酒精中浸泡**，取出固定于板上，在无菌条件下取脾。
　　(3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中，冰浴下轻轻洗去脾上的红血球。
　　(4)用镊子轻轻挤压脾，做成脾细胞悬液，用毛细管将悬液移入小试管中。
　　(5)直立小试管3min，使大块的结缔组织下沉，把细胞悬液移入离心管中。
　　(6)以2.5%FCS—1640充满离心管，并以400g离心7min～10min（与此同时应开始制备骨髓细胞）。
　　(7)把沉淀用约10ml的新鲜培养液再悬浮。
　　(8)重复⑹、⑺步骤。
　　(9)计算细胞，以台盼兰染色用相差显微镜检查，活细胞数应高于80%为合格。
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